细胞生长曲线的绘制实验报告范文

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篇一:实验五 微生物生长量的测定及生长曲线的绘制

一、实验目的

学习培训掌握微生物菌种生长率测量的方式

学习培训掌握病菌生长曲线图的绘图方法

学习培训把握血细胞计数板的使用方法

(一)微生物菌种生长率的测量

计数法 重量法 生理指标法

1、光学显微镜立即计数法

(1)运用血细胞计数板记数

(2)玻片记数

2、活菌菌落计数法

3、滤膜法

(二)病菌生长曲线图

将单细胞病菌注射到稳定容量的液体培养基中,不填补营养物质或移去塑造物,病菌以二分裂方法繁育,以时间段为横坐标轴,病菌数量的对标值为纵轴,可画出一条体现病菌在整个培育期内菌数变化趋势的曲线图,称之为生长曲线图(growth curve)

篇二:体细胞生长曲线图的测量

体细胞生长曲线图的测量

一、实验目的

把握测量体细胞生长曲线图的方式。

二、试验器材

24孔细胞培养板、少量加样器、eppendorf管、离心管、离心管盒、光学显微镜、细胞计数板、玻璃片、盖玻片、塑料吸管、试管架、一般光学显微镜、细胞悬液、0.4%台盼蓝。

三、实验方法

1. 培养细胞:最先在24孔细胞培养板内各自注射同样数目的体细胞,记数并纪录注射的细胞悬液相对密度,接种时间记作0钟头。

2. 记数细胞密度:从接种时间起算,间隔24钟头记数3孔的细胞密度,计算均值。为提升准确度,对每孔体细胞可计数2-3次,这般实际操作至第七天完毕。

3. 绘制曲线:以塑造时长为横坐标轴、细胞密度为纵轴,将所有结论在坐标纸上制图,即得所培养细胞的生长曲线图。

篇三:MTT法制作生长曲线图

实验材料:

1,5�S-L-DMEM, 5x104个/ml细胞悬浮液,5mg/mlMTT水溶液,DMSO,0.01M PBS,2, 96填料共7个,酶标仪,50ml离心管架,1.5ml离心管架,0.22μm滤纸,锡纸,MTT切削液(1ml/管)

实验步骤:

1, 各自选择发育较好的P1、P3、P5代BMSCs消化吸收后制取成细胞悬液,调节细胞密度为5x104/ml。注射到96填料,每孔注射200μl细胞悬浮液开展塑造(每孔1x104体细胞)。

2, 塑造16-48后,每日挑选6个塑造孔分别添加MTT水溶液(5mg/ml)20μl,37℃再次孵育。

3, 孵育4h后停止塑造,吸出来孔里上清,这时应当歪斜96填料,用枪嘴当心的将上清液吸掉,不能吸掉下边的结晶体颗粒物,渐渐地吸掉。每孔添加150μlDMSO,室内温度震荡10min,使结晶体充足融解,于实验孔平行面设不用体细胞只去加细胞培养液的空白试验1孔。

常见问题:

【1】 1, 两种方法分离出来中小型猪骨髓胚胎干细胞的较为

各自取2组0,1,3代体细胞,做成1x103的细胞悬液,注射到96填料,每孔细胞悬液200微升,置37℃、5%CO2饱和湿度孵箱内孵育,每组每24钟头各自取下4孔,每孔添加MTT(2mg/ml)20微升 37℃孵育,4h后吸弃孔里细胞培养液,每孔添加150微升分析纯的二甲基亚砜,移至酶联免疫检查仪上震荡10min,用光度计在492nm波优点测量每孔的吸光度值(OD492),以OD(492)数值纵轴,时长为横坐标轴制作生长曲线图

【2】 来源于:SD大鼠脊髓胚胎干细胞身体之外分离培养的实验研究

大白鼠MSCs生长曲线图测量:为了更好地定量分析测量大白鼠BMSCs的生长发育情况,对来自同一小动物的原代细胞开展连续培养。各自选择发育较好的P1、P3、P5代BMSCs消化吸收后制取成细胞悬液,调节细胞密度为5x104/ml。注射到96填料,每孔注射200μl细胞悬浮液开展塑造(每孔1x104体细胞)。次日起每日挑选6个塑造孔分别添加MTT水溶液(5mg/ml)20μl,37℃再次孵育4h后停止塑造,吸出来孔里上清,每孔添加150μlDMSO,室内温度震荡10min,使结晶体充足融解,于实验孔平行面设不用体细胞只去加细胞培养液的空白试验1孔。在酶标仪上挑选570nm波长,以空缺孔调零,测量各孔OD值(A)值,持续测7天,以时间段为横坐标,A数值纵坐标制作体细胞生长曲线图。

精选图文

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