总糖实验报告范本

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  糖在大家日常生活中经常可以看到,大家吃的白米饭、新鲜水果、零食中多多少少都包含一些糖原。与此同时,糖也是大家保持身体健身运动所不可缺少的化学物质,没了它,就没有了动能的由来。大家此次便走入试验室探寻糖原的秘密。此次试验大家将用3,5—二氟苯水杨酸钠测定方法总糖和还原性糖中的糖份。此次研究中,大家不仅要把握还原性糖和总糖的测量基本概念还需要学习培训酶活性测定测量还原性糖的操作步骤及其分分光光度法测量的基本原理和方式。

  最先,让我们一起来了解一下他们的测定法吧。还原糖的测定是糖定量分析检测的主要方式。还原性糖就是指带有随意醛基或酮基的糖原,糖类全是还原性糖,双糖和灵芝多糖不一定是还原性糖,在其中乳清蛋白和麦牙糖是还原性糖,绵白糖和淀粉是非还原糖。运用糖的溶解性不一样,可将绿色植物试品中的糖类、双糖和灵芝多糖各自获取出去,对并没有氧化性的双糖和灵芝多糖,可以用酸水打法使其溶解成有氧化性的糖类开展测量,再各自求出试品中还原性糖和总糖的成分(还原性糖以葡萄糖水成分计)。还原性糖在酸性情况下加温被氧化成葡萄糖酸以及它物质,3,5-二氟苯水杨酸钠则被复原为红棕色的3-羟基-5-氟苯水杨酸钠。在一定区域内,还原性糖的量与红棕色化学物质色调的浓淡正相关关联,运用原子吸收光谱,在540nm光波长下测量光密度值,核对标曲并测算,便能求出试品中还原性糖和总糖的成分。因为灵芝多糖水解反应为糖类时,每破裂一个糖苷键需添加一分子水,因此在预估灵芝多糖成分时要乘于0.9。

  一、试验目地

  1、把握还原性糖和总糖的测量的基本概念

  2、学习培训酶活性测定测量还原性糖的操作步骤 3、学习培训气相色谱法测量的基本原理和方式

  二、实验原理

  还原糖的测定是糖定量分析检测的主要方式。还原性糖就是指带有随意醛基或酮基

  的糖原,糖类全是还原性糖,双糖和灵芝多糖不一定是还原性糖,在其中乳清蛋白和麦牙糖是还原性糖,绵白糖和淀粉是非还原糖。运用糖的溶解性不一样,可将绿色植物试品中的糖类、双糖和灵芝多糖各自获取出去,对并没有氧化性的双糖和灵芝多糖,可以用酸水打法使其溶解成有氧化性的糖类开展测量,再各自求出试品中还原性糖和总糖的成分(还原性糖以葡萄糖水成分计)。

  还原性糖在酸性情况下加温被氧化成葡萄糖酸以及它物质,3,5-二氟苯水杨酸钠则被复原为红棕色的3-羟基-5-氟苯水杨酸钠。在一定区域内,还原性糖的量与红棕色化学物质色调的浓淡正相关关联,运用原子吸收光谱,在540nm光波长下测量光密度值,核对标曲并测算,便能求出试品中还原性糖和总糖的成分。因为灵芝多糖水解反应为糖类时,每破裂一个糖苷键需添加一分子水,因此在预估灵芝多糖成分时要乘于0.9。

  三、原材料与器材的提前准备。

  试验原材料:小麦面粉。 试剂

  (1)、1mg/mL葡萄糖水规范液

  精确称量80℃烘至恒重的分析纯葡萄糖水100mg,放置小烧瓶中,加少许纯净水融解后,迁移到100mL容量瓶中,用纯净水滴定剂至100mL,搅拌,4℃冰柜中储存预留。

  (2)、3,5-二氟苯水杨酸钠(DNS)实验试剂

  将6.3g DNS和262mL 2M NaOH水溶液,加进500mL带有185g酒石酸钾钠的热溶液中,加上5g结晶体酚和5g亚硫酸氢钠,拌和融解,制冷后加纯净水滴定剂至1000mL,贮于粽色瓶中预留。

  (3)、碘-碘化钾溶液:称量5g碘和10g碘酸钾,溶解100mL纯净水中。 (4)、酚酞指示剂:称量0.1g酚酞,溶解250mL 70%乙酸乙酯中。 (5)、6M HCl和6M NaOH各100mL。 实验器材

  (1)具塞夹层玻璃标尺试管婴儿:20mL×11(2)大离心管架:50mL×2

  (3)量杯:100mL×1 (4)三角瓶:100mL×1 (5)容量瓶:100mL×3

  (6)标尺塑料吸管:1mL×1;2mL×2;10mL×1 (7)恒温水浴锅 (8)开水浴 (9)原子吸收光谱

  分光光度计的基础原理是液体中的成分在光的光照下,造成了对吸光的效用,化学物质对光线的吸附是具备可选择性的。各种各样不一样的成分都有着其自己的光谱图,因而当某可见光根据水溶液时,其动能便会被吸附而变弱,光动能变弱的水平和成分的含量有一定的比率关联,也即合乎色度基本原理——Lambert-Beer's law:

  数学课关系式:

  A=lg(1/T)=KCL

  A为OD值T为透射系数,是投影光抗压强度比上入射角抗压强度

  C为吸光度化学物质的浓度值 L为消化吸收层薄厚 K为吸收率 物理意义是当一束平行面可见光竖直根据某一匀称非透射的西光化学物质时,其OD值A与吸光度化学物质的浓度值C及消化吸收层薄厚L正相关.

  四、实验步骤。

  器械与原材料提前准备结束以后,便逐渐依照下列过程开展试验。最先,制做葡萄糖水标曲。取6支20mL 具塞标尺试管婴儿序号,按住表各自添加含量为1mg/mL 的葡萄糖水规范液、纯净水和3,5-二氟苯水杨酸钠(DNS)实验试剂,配出不一样葡萄糖水成分的反映液。

  下面,获取还原性糖。精确称量2.00g 服用小麦面粉,放进100mL 量杯中,先用少许纯净水调成粘稠,随后添加50mL 纯净水,搅拌,放置50℃恒温水浴中

  隔热保温20min,使还原性糖浸取。过虑,将渗沥液搜集在100ml容量瓶中,用纯净水滴定剂至标尺,搅拌,做为还原性糖待测液。

  随后,获取总糖。精确称量1.00g服用小麦面粉,放进100mL三角瓶中,加15mL纯净水及10mL 6M HCl,置开水浴中加温水解反应30min(水解是不是彻底可以用碘-碘化钾溶液查验)。待三角瓶中的水解反应液制冷后,添加1 滴酚酞指示剂,用6mol/LNaOH 中合至微鲜红色,用纯净水滴定剂在100mL容量瓶中,搅拌。将滴定剂后的水解反应液过虑,取渗沥液10mL,移进另一100mL容量瓶中滴定剂,搅拌,做为总糖被测液。

  随后,取4支20mL 具塞标尺试管婴儿,序号,6、7、8、9,按住表所显示各自添加待测液和铬黑T。

  最终,用原子吸收光谱开展色度。先将设备开启加热20min。挑选540nm的光波长。再按MODE键转换到T,将黑体字放进环路中,合顶盖,0键校零。再按MODE键转换到A,将倒进比色皿中的0号液态放进到环路中,合顶盖,100键校零。再将倒进比色皿中的各号液态放进到环路中就可以测得光密度值。

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